เรื่องราวเริ่มต้นในปี 1936 โดย อินเดียนา โจนส์ (รับบทโดย Harrison Ford) เป็นนักโบราณคดีและนักล่าสมบัติที่ได้รับภารกิจจากรัฐบาลสหรัฐฯ ให้ค้นหา “หีบพันธสัญญา” (Ark of the Covenant) ซึ่งเชื่อกันว่ามีพลังศักดิ์สิทธิ์ที่สามารถทำลายทุกสิ่ง
หลังจากที่อินเดียนาได้ข้อมูลจากอดีตเพื่อนร่วมงานของเขา เขาต้องเผชิญกับความท้าทายมากมาย รวมถึงการต่อสู้กับกลุ่มนาซีที่ต้องการหีบพันธสัญญาเช่นกัน อินเดียนาจึงต้องเดินทางไปยังสถานที่ต่าง ๆ รวมถึงอียิปต์ เพื่อหยุดยั้งแผนการของนาซีและค้นหาหีบก่อนที่พวกเขาจะใช้มันในทางที่ไม่ถูกต้อง
