หลังจากการเลิกกับ Joker, Harley Quinn (รับบทโดย Margot Robbie) ต้องเริ่มต้นชีวิตใหม่ และกลายเป็นเป้าหมายของอาชญากรใน Gotham City โดยเฉพาะ Roman Sionis (รับบทโดย Ewan McGregor), เจ้าพ่ออาชญากรที่มีอำนาจและกองทัพของผู้ติดตาม
Harley ตัดสินใจที่จะรวมตัวกับกลุ่มผู้หญิงที่มีความสามารถพิเศษเพื่อทำภารกิจในการต่อต้าน Roman และช่วย Cassandra Cain (รับบทโดย Ella Jay Basco), เด็กสาวที่ถูกจับกุมโดย Roman เพื่อปกป้องเธอจากอันตราย
