เรื่องราวเกิดขึ้นต่อจากเหตุการณ์ในภาคก่อนหน้านี้ โดย Selene (รับบทโดย Kate Beckinsale) ถูกจับตัวไปโดยองค์กรที่มีอำนาจ ซึ่งทำการทดลองเกี่ยวกับสายพันธุ์ของเธอและมนุษย์หมาป่า
หลังจากที่ Selene หลุดพ้นจากการถูกควบคุม เธอพบว่าโลกได้เปลี่ยนไปมาก เธอได้เรียนรู้ว่ามนุษย์ได้รู้ถึงการมีอยู่ของเธอและเริ่มทำสงครามเพื่อล่าแวมไพร์และมนุษย์หมาป่า ในระหว่างการค้นหา Selene ก็ได้พบกับ Lynn (รับบทโดย India Eisley), เด็กสาวที่มีความสำคัญต่อเธอและมีสายเลือดที่พิเศษ
Selene ต้องต่อสู้กับทั้งศัตรูเก่าและใหม่ พร้อมทั้งค้นหาความจริงเกี่ยวกับอดีตของเธอและการล่วงรู้ของมนุษย์ที่ทำให้โลกของเธอต้องเผชิญกับภัยคุกคามที่ใหญ่ขึ้น
